到贵阳文明书院讲学后，王阳明的“心即理”思想不断发展延伸，一纠当时时风之弊，一纠知识分子空谈、虚谈之病。《阳明先生年谱》记载“是年，先生始论知行合一”，如果说“心即理”是王阳明心学的基石，那么“知行合一”则是心学重要的发展。“知行合一”说给当时的人们带来了巨大的冲击，因为朱熹曾提出“先知后行”说，认为必须认清万物之理，然后才能去实践，这在当时被认为是绝对的真理。在朱子学一统天下的时代，起初众人并不能理解“知行合一”说的本意，甚至有人将其视为异端。

在贵阳期间，席书曾多次请教王阳明朱熹和陆九渊学术思想的异同，但王阳明却不谈朱陆之学，只谈自己悟到的“格物致知”和“知行合一”之说。